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囊胚注射實(shí)驗(yàn)是一種將外源細(xì)胞(如胚胎干細(xì)胞或基因編輯后的細(xì)胞)注入早期胚胎(囊胚期)的技術(shù),用于制備嵌合體或轉(zhuǎn)基因動物模型。注射的細(xì)胞可參與胚胎發(fā)育,形成嵌合體個體,其中部分組織或器官由外源細(xì)胞構(gòu)成。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型建立及再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,是研究細(xì)胞分化、發(fā)育生物學(xué)和基因編輯的重要工具。
原核注射實(shí)驗(yàn)是一種將外源DNA直接注入受精卵原核(通常為雄原核)中的轉(zhuǎn)基因技術(shù),用于制備轉(zhuǎn)基因動物模型。注射后,外源基因可隨機(jī)整合到宿主基因組中,并在后續(xù)發(fā)育中穩(wěn)定遺傳。該方法操作簡便、效率較高,是構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠等模式生物的常用手段,廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型建立及藥物開發(fā)等領(lǐng)域。
慢病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是一種利用改造后的慢病毒載體將外源基因穩(wěn)定導(dǎo)入宿主細(xì)胞的技術(shù)。慢病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒,具有感染分裂和非分裂細(xì)胞的能力,能將目的基因整合到宿主基因組中,實(shí)現(xiàn)長期穩(wěn)定表達(dá)。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于基因功能研究、基因治療和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)的制備等領(lǐng)域。
基因增強(qiáng)是指通過特定機(jī)制提高基因表達(dá)水平或增強(qiáng)基因功能的過程,通常涉及增強(qiáng)子序列、轉(zhuǎn)錄激活因子或表觀遺傳修飾的調(diào)控。增強(qiáng)子是一類能夠遠(yuǎn)距離促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄的DNA序列,通過與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,顯著提高目標(biāo)基因的表達(dá)效率。在細(xì)胞發(fā)育、組織特異性表達(dá)和疾病發(fā)生中具有重要作用,也是基因工程和基因治療中的關(guān)鍵調(diào)控手段。
基因沉默實(shí)驗(yàn)是指細(xì)胞內(nèi)特定基因的表達(dá)被抑制或關(guān)閉的現(xiàn)象,通常發(fā)生在轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后水平。常見的機(jī)制包括DNA甲基化、組蛋白修飾以及RNA干擾(如siRNA和miRNA介導(dǎo)的mRNA降解或翻譯抑制)?;虺聊谡{(diào)控基因表達(dá)、維持基因組穩(wěn)定性、細(xì)胞分化以及防御病毒等方面具有重要作用,同時也與某些疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。
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